Abstract

CASTANON, María Mercedes; STEYERTHA, Noemí; JUAN MIGUE, Castagnino  and  GARBOSSA, Graciela. Aplicación de un método de electroforesis capilar al estudio de la glicosilación de albúmina in vitro. Acta bioquím. clín. latinoam. [online]. 2006, vol.40, n.4, pp.473-482. ISSN 0325-2957.

Los azúcares reductores como la glucosa pueden reaccionar no enzimáticamente con los grupos amino libres de las proteínas generando productos de glicosilación avanzados (AGEs). El objetivo del presente trabajo fue desarrollar un método de electroforesis capilar de zona (ECZ) para estudiar albúmina glicosilada in vitro. Se realizaron incubaciones de albúmina bovina y suero humano con glucosa (0,5 M) durante 12, 24 y 60 días. Como inhibidor de la glicosilación se utilizó aminoguanidina (AG; 0,5 M). Al finalizar la incubación la albúmina sérica fue separada por precipitación fraccionada y redisuelta en buffer fosfato-salino. La detección de AGEs fluorescentes (lexcitación=338 nm, lemisión 20 °C; ldet=200 nm) se observó prolongación de los tiempos de migración y ensanchamiento de los picos con el aumento del tiempo de incubación. Estos parámetros se redujeron sólo parcialmente en presencia de AG. En conclusión, la ECZ presenta mayor sensibilidad para discriminar estadios intermedios del proceso de glicosilación, resultando un método complementario al análisis por fluorometría utilizado para el estudio de AGEs.

Keywords : productos finales de glicosilación avanzada; electroforesis capilar; fluorometría; albúmina sérica bovina; albúmina sérica humana; aminoguanidina.

        · abstract in English     · text in Spanish     · Spanish ( pdf )