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Acta toxicológica argentina
On-line version ISSN 1851-3743
Abstract
CHOLICH, Valeria; GARCIA, Graciela; MARTINEZ, Alejandra and EVANGELISTA DE DUFFARD, Ana María. Inmunomarcación de neuronas dopaminérgicas en cortes flotantes de hipotálamo de rata: preservación alternativa del tejido nervioso antes del corte. Acta toxicol. argent. [online]. 2008, vol.16, n.1, pp.1-4. ISSN 1851-3743.
Se realizó un estudio inmunohistoquímico de la enzima tirosina hidroxilasa (marcador de neuronas dopaminérgicas) en el hipotálamo de ratas Wistar machos adultas en cortes flotantes de muestras fijadas por perfusión. Debido a que el número de cerebros que se procesaron fue superior al número que pueden ser cortados inmediatamente, el material debió almacenarse congelando los cerebros enteros a -80ºC. Pero por un desperfecto técnico del equipo de refrigeración, las muestras debieron trasladarse a -20ºC resultando en el deterioro de las mismas. Ante este inconveniente, los sucesivos cerebros fueron almacenados en sacarosa al 30% p/v en buffer fosfato salino (PBS) con 0,01% de azida sódica y mantenidos a 4ºC durante tiempos variables (de semanas a meses) hasta ser congelados con gas clorofluorado y cortados. Estos cerebros no mostraron alteración en la estructura morfológica del tejido. Esta metodología de preservación aquí descrita sería una alternativa de elección válida para aquellos laboratorios que no cuenten con un equipo de refrigeración de -80ºC.
Keywords : Inmunohistoquímica; Tirosina hidroxilasa; Cortes flotantes; Criopreservación.