Introducción

Una de las principales patologías que afectan a los perros de cualquier raza o género es la otitis externa (OE), que ocasiona prurito intenso, dolor, otorrea persistente uni o bilateral, así como olor fétido ¹⁸. Se encuentra incluida entre los problemas dermatológicos, alcanzando una frecuencia de 10-20% entre la población canina ^{5, 18}. Muchos microorganismos pueden ocasionarla, entre ellos, Pseudomonas sp, Staphylococcus sp, Streptococcus sp y Escherichia coli ^{4, 13, 27}. Pseudomonas aeruginosa, bacteria Gram negativa, aerobia, no fermentadora de la glucosa, es una de las predominantes en la OE (Rev.Biomed. 19: 156-160; Acta Bioq.Clin.Lat. 48: 465-474), indicándose su presencia hasta en un 11,9% ²⁴, siendo variable su susceptibilidad a los antibióticos, lo cual se agrava debido a los múltiples mecanismos de resistencia que presenta ^{20, 23}. El propósito de este estudio fue constatar los niveles de susceptibilidad a los antibióticos comúnmente usados en la OE en una clínica veterinaria privada durante un período de tres años.

Material y Métodos

La vigilancia prospectiva se realizó desde una clínica veterinaria ubicada en el distrito de Bellavista, Callao, Perú. Se incluyeron los resultados de los pacientes con sospecha de otitis, a los que se les solicitó un análisis de laboratorio entre enero de 2013 y diciembre de 2015. A cada paciente se le efectuó un aislamiento con o sin tratamiento previo con antibióticos. La muestra fue tomada del canal auditivo externo, sembrada en agar McConkey y agar sangre, incubada por 24 h a 37°C, e identificada en base a sus características de cultivo, morfológicas y bioquímicas (utilización de lactosa, glucosa, citrato, prueba de oxidasa y crecimiento a 42°C). Los análisis se realizaron en el Laboratorio de Microbiología y Parasitología de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos (Lima, Perú). La susceptibilidad a los antibióticos fue evaluada con el método de difusión en agar (disco de Bauer-Kirby), acorde a las recomendaciones del Clinical and Laboratory Standards Institute ⁶. Las cepas con susceptibilidad intermedia se consideraron sensibles. El antibiograma incluyó varias clases de antibióticos, a saber: 1: betalactámicos: (penicilinas), amoxicilina/ácido clavulánico (30 μg) (cefalosporinas), cefalexina (30 μg), ceftriaxona (30 μg). 2: fluoroquinolonas: ciprofloxacina (5 μg), enrofloxacina (5 μg). 3: aminoglucósidos: gentamicina (10 μg), amikacina (30 μg), neomicina (30 μg), tobramicina (10 μg,). 4: lincosaminas: clindamicina (2 μg). 5: sulfamidas: sulfametoxazoltrimetoprima (25 μg). La multirresistencia se definió como resistencia a tres o más clases de antibióticos ²⁵. El análisis estadístico se efectuó con la versión 3.03 del programa OpenEpi, determinándose proporciones simples, intervalos de confianza y prueba chi-cuadrado (χ2).

Resultados y Discusión

De un total de 65 cultivos bacterianos, 20 cepas de P. aeruginosa (30,8%, IC 95% = 20,48 - 42,74) fueron aisladas en el período de estudio. Se registró una población heterogénea representada por 11 machos (55%, IC 95% = 33,28 - 75,36) y 9 hembras (45% IC 95% = 24,64 - 66,72). No hubo diferencias de infección según el sexo (p<0,05). El promedio de edad fue de cinco años y dos meses. La frecuencia de las cepas fue de 7, 4 y 9 en 2013, 2014 y 2015, respectivamente. La OE es muy común entre las patologías otológicas, afectando principalmente a los canes. Existen diversos factores predisponentes y perpetuantes involucrados, entre estos, las infecciones bacterianas son un ejemplo, teniendo a la P. aeruginosa como una de las más frecuentes y difíciles de tratar, debido a su amplia resistencia a los antibióticos ^{1, 14}. En nuestro estudio la sensibilidad a los aminoglucósidos fue de 94,4% (34/36) (Tabla 1). Otros estudios obtuvieron registros similares: en el caso específico de gentamicina, ha sido reportada al 98% en Bulgaria ²¹, 94% en Alemania 30, 85% en Canada ¹¹, 84,6% en Dinamarca ¹⁹ y 81% en Turquía ²⁹. Porcentajes menores se registraron al 71,4% en Brasil ²⁰, 70% en Colombia ³ y 67% en Kosovo ²⁴. En contraste, moderada resistencia fue reportada en Rumania (43,75%) ⁹ y Croacia (43,5%) ¹⁶.

Tabla 1 Resistencia a los antibióticos en P. aeruginosa aisladas de canes. 

Tabla 2 Razas de canes. 

Los principales mecanismos de resistencia a los aminoglucósidos en P. aeruginosa son la inactivación por enzimas modificantes, las alteraciones en la permeabilidad y la eliminación por bombas de expulsión. Las enzimas más frecuentes son la nucleotidiltransferasa (ANT(2’’)-I) que confiere resistencia a gentamicina, tobramicina, dibekacina y kanamicina; y la acetiltransferasa (AAC(6’)-II) cuyo sustrato es gentamicina, tobramicina y netilmicina ^{17, 22}. En cuanto a otros porcentajes de resistencia, se registraron valores elevados para cefalexina (88,9%), sulfametoxazol-trimetoprima (80%), amoxicilina/ácido clavulánico (77,8%) y clindamicina (75%) (Tabla 1). Diversos estudios han determinado porcentajes que van de 68,75% a 100% para estos antibióticos ^{3, 8, 11, 12, 19, 21, 28, 29}. Estos valores hallados refuerzan la necesidad del uso racional de los antibióticos en la práctica terapéutica de los casos de OE basados en pruebas in vitro de susceptibilidad, con el fin de incrementar la efectividad del tratamiento. Considerando las clases de antibióticos, los mayores porcentajes de resistencia se observaron en el grupo de las sulfamidas 80% (16/20), seguido de los betalactámicos 75% (30/40) y las lincosaminas 75% (6/8). Este hecho concuerda con datos obtenidos por otros investigadores ^{2, 15, 26}, quienes en cada clase casi siempre probaron un número diferente de antibióticos, los cuales también podían pertenecer a diferentes grupos dentro de una misma clase. En cuanto a la multirresistencia, el 70% de las cepas (14/20) presentaron esta característica, notándose que entre ellas, 10 cepas mostraron resistencia a tres clases de antibióticos, 2 frente a cuatro clases y otras 2 frente a cinco clases. Porcentajes menores han sido reportados por otros autores ^{7, 26}. Este fenómeno involucra un gran desafío actual, ya que la resistencia es seleccionada por el uso de los antibióticos ²⁹, estando directamente relacionada con el “arsenal genético” a disposición de las bacterias para adquirir e intercambiar genes de resistencia ¹⁰. Las principales razas afectadas (Tabla 2) fueron: schnauzer (4), shihtzu (2), labrador retriever (2) e indefinidas (10). Es dable tener en cuenta que los perros sin raza definida generalmente no obtienen muchos cuidados sanitarios por parte de sus propietarios, estando expuestos a situaciones que pueden favorecer la infección. Una vez producida, la atención veterinaria aún puede demorarse, debido a la falta de condiciones económicas de los dueños. Los resultados obtenidos indican que los aminoglucósidos, seguidos por las fluoroquinolonas, operan como eficaces opciones de tratamiento. Un uso racional de estos antibióticos se hace necesario para prolongar su utilidad en el tiempo, así como para investigar los aspectos moleculares y genéticos de la resistencia en P. aeruginosa.