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Revista de Ciencia y Tecnología
versión On-line ISSN 1851-7587
Resumen
RIERA, Mario Alejandro; ROJAS, María Eugenia y ZAPATA, Pedro Darío. Protocolo de extracción de DNA por salting-out para pequeños volúmenes de sangre. Rev. cienc. tecnol. [online]. 2010, n.14, pp.4-7. ISSN 1851-7587.
Se desarrolló un protocolo modificado de extracción de DNA por salting-out a partir de muestras de sangre con volúmenes decrecientes (300; 100; 50; 25; 10; 5; 2,5; 1 y 0,5 µL). Se llevó a cabo posteriormente una amplificación de un fragmento de 345 pb del gen de la protrombina y de un marcador STR (short tandem repeat) utilizado comúnmente para estudios de filiación, mediante la reacción en cadena de la polimerasa, visualizándose los amplicones en un gel de poliacrilamida al 6,4 %. En todos los casos, la reacción de amplificación fue exitosa, demostrando así que el protocolo de extracción desarrollado permite obtener DNA en condiciones de pureza y cantidad suficiente a partir de pequeños volúmenes de sangre. De este modo, puede disminuirse la cantidad de muestra necesaria para realizar un estudio molecular, lo cual es fundamental en áreas como la genética forense donde la cantidad de muestra disponible puede ser limitada.
Palabras clave : Muestras de sangre; Extracción DNA; salting-out; PCR.