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Revista argentina de microbiología
versão impressa ISSN 0325-7541versão On-line ISSN 1851-7617
Resumo
SAUKA, D. H.; MONELLA, R. H. e BENINTENDE, G. B.. Detección de genes que codifican proteínas mosquitocidas Cry11 de Bacillus thuringiensis mediante un método de PCR-RFLP novedoso. Rev. argent. microbiol. [online]. 2010, vol.42, n.1, pp.23-26. ISSN 0325-7541.
En el presente estudio se estableció una estrategia basada en la amplificación génica (PCR) y el posterior análisis de restricción (RFLP) para detectar todos los genes cry11 de Bacillus thuringiensis informados hasta ahora. De acuerdo con el análisis de las regiones conservadas en los genes cry11, se diseñaron dos cebadores para amplificar un fragmento de 1459 pb de los genes cry11Aa y un fragmento de 1471 pb de los genes cry11Ba y cry11Bb. Los productos de la amplificación fueron digeridos con la enzima de restricción HinfI. Se analizaron cepas exóticas de B. thuringiensis y aislamientos nativos de Argentina obtenidos a partir de muestras de suelos, hojas y polvillo de silos, para estudiar la distribución de los genes cry11. Los patrones de PCR-RFLP revelaron la presencia de genes cry11 en 3 de las 64 cepas exóticas y en 10 de los 107 aislamientos nativos de B. thuringiensis ensayados. Sólo se detectó la subclase cry11Aa entre estas bacterias. Ya que esta metodología fue también desarrollada para detectar genes cry11Ba y cry11Bb, se requeriría una futura confirmación experimental. Los resultados obtenidos nos permiten inferir que el método de PCR-RFLP constituiría una herramienta valiosa para la detección específica de genes que codifican proteínas mosquitocidas Cry11 de B. thuringiensis.
Palavras-chave : Bacillus thuringiensis; Cry11; PCR-RFLP.