Resumo

CRUZANS, P.R.; CAROU, M.C.; LORENZO, M.S.  e  LOMBARDO, D.M. Apoptosis inducida por un análogo de GnRH en una línea celular de granulosa de ovario bovino (BGC-1). InVet [online]. 2012, vol.14, n.1, pp.101-110. ISSN 1668-3498.

Se han identificado receptores de la hormona liberadora de gonadotrofina (GnRHR) en células de granulosa ovárica (CG) y en células luteales (CL). Asimismo, se ha observado que la activación de los GnRHR en CG regula la función gonadal. Estudios realizados utilizando agonistas de GnRH (GnRHa) en ovarios de ratas, in vivo e in vitro, demostraron un incremento de la atresia folicular. Nuestro objetivo fue estudiar la regulación de la apoptosis en una línea establecida de células de granulosa de ovario bovino (BGC-1) utilizando el acetato de leuprolide (LA) como GnRHa y el ANTIDE como antagonista competitivo. Nuestros resultados demuestran un aumento significativo de la proporción de células apoptóticas inducidas durante 24 y 48 h con 100 nM LA, confirmado mediante técnicas morfológicas (tinción con DAPI y Hematoxilina), técnicas de expresión de marcadores en membrana (Anexina V-FITC y PI detectada por citometría de flujo) y técnicas bioquímicas como la determinación de la actividad de caspasa 3. La apoptosis fue parcialmente inhibida por el ANTIDE, registrándose una actividad per se del mismo cuando se evaluó actividad de caspasa 3. El análisis de las vías intracelulares de regulación del proceso apoptótico reveló la existencia de un mecanismo que involucra la activación por la vía intrínseca, a través del análisis de la expresión de proteínas de la familia Bcl-2 (Bax y Bcl-2) y la inhibición de la vía extrínseca, a través de la inhibición de la actividad de la enzima fosfolipasa D (PLD). Proponemos que el ANTIDE actúa como antagonista de la vía intrínseca pero como agonista de la vía extrínseca inhibiendo la actividad de PLD.

Palavras-chave : Apoptosis; BGC-1; Acetato de leuprolide; GnRH.

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