Introducción

En el Paraguay el desarrollo económico se encuentra basado en la producción pecuaria, ya que cuenta con mayor área potencial apto para la explotación ganadera, estimativamente 60% del área total del país, este rubro contribuye de manera significativa con el PIB ¹.

El poco aprovechamiento de los recursos genéticos en hembras bovinas de alto potencial productivo representa una limintante, inclusive con la implementación de la superovulaciòn y transferencias de embriones, dado que el número de embriones transferibles producidos por el animal es reducido.

Con el propósito de superar estas limitantes se desarrolló la aspiración folicular guida por ultrasonido, una técnica que ha demostrado ser exitosa y reproducible para la obtención de oocitos a partir de vacas y vaquillas, y que acoplada a la producción in vitro de embriones, es más eficiente que la superovulación y la transferencia de embriones ².

La aspiración folicular transvaginal es una técnica mediante la cual los ovocitos inmaduros son recolectados de los folículos, para llevarlo a cabo se requiere contar con un equipo de ultrasonografía, una bomba de aspiración y un sistema de guía de la aguja, el uso de esta técnica permite incrementar el nèmro de embrions transferibles y de preñeces por vaca por año ³.

El intervalo entre sesiones de OPU tiene una influencia sobre la cantidad y calidad de los ovocitos obtenidos. El periodo de tiempo entre dos aspiraciones afecta, de forma significativa la tasa de producción de ovocitos. Obteniéndose un mayor número con intervalos de 7 días en comparación con la obtención cada 3 o 4 días. Sin embargo, la calidad de ovocitos, en cuanto al número de capas de células del cúmulo, resulta mayor con OPU a intervalos de 3 días y menor con intervalos de 7 días, viéndose también afectado el desarrollo embrionario ⁴.

La finalidad que tiene esta herramienta de reproducción es la de crear un banco de material genético de animales en peligros de extinción, también permite reutilizar a las vacas donantes de ovocitos a intervalos más cortos de tiempo, el material recolectado es de procedencia conocida y si son vacas de alto valor genético conduce a mejorar la productividad del rebaño ⁵.

La eficiencia de recuperación de ovocitos en bovinos a través de OPU, tanto en la cantidad como en la calidad de los ovocitos aspirados está sujeta a muchos factores relacionados a la donante ⁶, genética, estado fisiológico, raza y condición corporal.

Material y métodos

El análisis retrospectivo se llevó a cabo en el Departamento de Alto Paraná - Paraguay, utilizando 10 registros de vacas Brangus sometidas a Aspiraciones foliculares sucesivas. Los registros contenían informes de vacas sometidas a 7 aspiraciones foliculares, teniendo encuenta para el análisis de los mismos, datos sobre la cantidad y calidad de folículos aspirados.

Las mismas fueron aspiradas con intervalos de 45 días en promedio. Los resultados de cantidad de ovocitos fueron analizados con T- Student y para calidad de ovocitos se utilizó Chi², utilizando Infostad versión estudiantil ⁷.

Resultados y discusión

Cantidad de ovocitos: Se obtuvo un total de 2066 ovocitos con un promedio de 207 ovocitos ± 14 ovocitos por vaca (ver cuadro 1); comparado con el trabajo realizado por Alvarado et al (2008) (8) el cual menciona que la cantidad de ovocitos obtenidos fue de 100,75 ovocitos en promedio por vaca, esta diferencia puede deberse a que existen variabilidades entre donadoras de ovocitos como ser: raza, estado nutricional, estrés y/o época del ciclo (reserva ovárica), o la falta de una previa estimulación hormonal.

Analizando la cantidad de ovocitos obtenidos por aspiraciones, se puede observar en el cuadro 1, que todas las donantes obtuvieron buenos resultados en la primera aspiración, no así en la segunda aspiración, en la cual se presenta una disminución, llegando a la tercera aspiración donde se presenta un pequeño aumento en la cantidad de ovocitos aspirados, lo cual disminuye nuevamente en la cuarta aspiración, y está comparando con los resultados de la primera aspiración, no presenta diferencias significativas estadísticamente (p>0.05).

Observando y comparando el resultado de la primera con la séptima aspiración, se denota una disminución en la cantidad de ovocitos aspirados, siendo esta diferencia estadísticamente significativa (p<0,05), mediante el t student.

En un estudio realizado en Perú sobre: Aspiración folicular guiada mediante la ultrasonografía con el transductor endovaginal humano, para la colección de ovocitos en vacas brown swiss en altura, en la cual se realizaron 6 sesiones de aspirados en cuatro vacas, obteniendo un total de 72 folículos aspirados y 14 ovocitos recuperados, esto no coincide con lo obtenido en el presente trabajo, ya que se obtuvo mayor cantidad de folículos y ovocitos, esta diferencia entre trabajos, puede deberse a que las vacas pertenecientes a lo ejecutado por Quispe (2018: 9) recibieron estimulación hormonal previa, no así en las vacas brangus pertenecientes al presente estudio.

Cantidad de ovocitos viables: En cuanto a la cantidad de ovocitos viables (figura 1) al final de las 7 aspiraciones se obtuvo un total de 206 ovocitos viables con un desvío estándar de ± 30 ovocitos y la cantidad total de ovocitos no viables fue de 88 ovocitos en promedio con un desvío estándar de ± 32 ovocitos.

Se realizó la comparación al azar de la cantidad de ovocitos viables entre la primera aspiración (219) con la cuarta aspiración (201) donde se pudo observar que hubo diferencias estadísticamente significativas, así también se comparó la primera aspiración (219) con la última aspiración (175) y arrojó resultados estadísticamente significativos mediante la prueba chi cuadrado.

En un trabajo realizado por Rubia Cristina de Miranda (10), sobre el Efecto entre intervalo de aspiraciones foliculares en calidad de ovocitos bovino en la raza Gir, el número total de ovocitos viables fue de 130, el número total de ovocitos inviables total fue de 156. Se

puede observar que se obtuvo mayores resultados en este trabajo, y esta diferencia puede deberse a la raza que se utilizó para el estudio.

Calidad de ovocitos: En la figura 2 se presentan los resultados de la clasificación de ovocitos viables en Grado I, II y III, siendo los deseables para la fertilización los de grado I y II. Se puede observar que, en todas las aspiraciones, se obtuvieron mayor cantidad de ovocitos G3 (49,1) igualmente deseable para las fertilizaciones, pero no tan utilizados.

Los mismos fueron clasificados teniendo en cuenta como referencia la morfología del citoplasma y las células del cumulus (ver cuadro 1). En un trabajo realizado por María Alejandra Ángel (11) obtuvieron mejores resultados en el Grado l, seguida por Grado ll y finalizando con Grado lll.

En el mismo obtuvieron 33,6 % de ovocitos viables, porcentaje muy por debajo de lo obtenido en el presente estudio (11). Los menores niveles obtenidos pueden deber a factores tales como: diferentes niveles de presión de vacío utilizado durante la aspiración folicular, la preparación de las vacas donantes, la alimentación, la pre estimulación y el número de folículos aspirados (36).

Realizando una comparación de la calidad según aspiración, se puede observar que en la primera aspiración (22,4) se obtuvo más ovocitos G1(35), GII (16) y GIII (17,3); en la cuarta aspiración, G1 (8), GII (23), GIII (17), por otra parte, en la aspiración 7, se registra G1 (15), GII (12), GIII (14,8). Estas diferencias arrojaron resultados estadísticamente no significativos entre las primeras, cuarta y séptima aspiraciones (p>0,05), mediante el Chi cuadrado.

En conclusión, las aspiraciones foliculares sucesivas en intervalos promedio de 45 días afectan la calidad y cantidad de ovocitos obtenidos. Esto también puede deberse a que no existió estimulación hormonal.

Se sugiere realizar aspiraciones en intervalos promedio de 20 días previa estimulación hormonal, haciendo coincidir con el ciclo estral de la vaca.